Đặc điểm lâm sàng và phân tử của Hypervi kháng carbapenem

JavaScript hiện không khả dụng trên trình duyệt của bạn.Khi javascript bị vô hiệu hóa, một số chức năng của trang web này sẽ không hoạt động.
Đăng ký thông tin chi tiết cụ thể và các loại thuốc cụ thể mà bạn quan tâm, và chúng tôi sẽ khớp thông tin bạn cung cấp với các bài báo trong cơ sở dữ liệu phong phú của chúng tôi và gửi cho bạn bản sao PDF qua email kịp thời.
Đặc điểm lâm sàng và phân tử của Klebsiella pneumoniae độc ​​lực cao kháng carbapenem tại một bệnh viện cấp ba ở Thượng Hải
Zhou Cong, 1 Wu Qiang, 1 He Leqi, 1 Zhang Hui, 1 Xu Maosuo, 1 Bao Yuyuan, 2 Jin Zhi, 3 Fang Shen 11 Khoa Y học Xét nghiệm Lâm sàng, Bệnh viện Nhân dân số 5 Thượng Hải, Đại học Fudan, Thượng Hải, Cộng hòa Nhân dân Trung Quốc;2 Thượng Hải Jiaotong Khoa Y học Xét nghiệm, Bệnh viện Nhi Thượng Hải, Thượng Hải, Cộng hòa Nhân dân Trung Hoa;3 Khoa Thần kinh, Bệnh viện Nhân dân Thứ năm Thượng Hải, Đại học Phúc Đán Tác giả tương ứng: Fang Shen, Khoa Y học Phòng thí nghiệm Lâm sàng, Bệnh viện Nhân dân Thứ năm Thượng Hải, Đại học Fudan, Số 128 Đường Ruili, Quận Minhang, Thượng Hải, Mã bưu điện 200240 của Trung QuốcTel +86 18021073261 Email [email được bảo vệ] Thông tin cơ bản: Sự kết hợp giữa kháng carbapenem và tăng tiết dịch ở Klebsiella pneumoniae đã dẫn đến những thách thức lớn về sức khỏe cộng đồng.Trong những năm gần đây, ngày càng có nhiều báo cáo về các chủng Klebsiella pneumoniae (CR-hvKP) độc lực cao kháng carbapenem.Vật liệu và phương pháp: Phân tích hồi cứu việc đánh giá dữ liệu lâm sàng của bệnh nhân nhiễm CR-hvKP từ tháng 1 năm 2019 đến tháng 12 năm 2020 tại bệnh viện cấp ba.Tính toán Klebsiella pneumoniae, Klebsiella pneumoniae (hmKP), Klebsiella pneumoniae kháng carbapenem (CR-hmKP) và viêm phổi độc lực cao kháng carbapenem thu thập trong vòng 2 năm Số lượng phân lập Leberella (CR-hvKP).PCR phát hiện các gen kháng thuốc, các gen liên quan đến độc lực, các gen kiểu huyết thanh hình mũ và đánh trình tự đa bộ (MLST) của các chủng CR-hvKP.Kết quả: Tổng số 1081 chủng Klebsiella pneumoniae không lặp lại đã được phân lập trong quá trình nghiên cứu., Trong đó có 392 chủng Klebsiella pneumoniae (36,3%), 39 chủng CR-hmKP (3,6%) và 16 chủng CR-hvKP (1,5%).Khoảng 31,2% (5/16) CR-hvKP sẽ được phân lập vào năm 2019 và khoảng 68,8% (11/16) CR-hvKP sẽ được phân lập vào năm 2020. Trong số 16 chủng CR-hvKP, 13 chủng là ST11 và serotype K64, 1 chủng là kiểu huyết thanh ST11 và K47, 1 chủng là kiểu huyết thanh ST23 và K1, và 1 chủng là kiểu huyết thanh ST86 và K2.Các gen liên quan đến độc lực entB, fimH, rmpA2, iutA và iucA có mặt trong tất cả 16 chủng CR-hvKP phân lập, tiếp theo là mrkD (n = 14), rmpA (n = 13), aerobactin (n = 2), AllS ( n = 1).16 CR-hvKP phân lập đều mang gen carbapenemase blaKPC-2 và gen β-lactamase phổ mở rộng blaSHV.Kết quả lấy dấu vân tay ERIC-PCR DNA cho thấy 16 chủng CR-hvKP có tính đa hình cao và các dải của mỗi chủng khác nhau đáng kể, thể hiện trạng thái rời rạc.Kết luận: Mặc dù CR-hvKP được phân phối không thường xuyên, nhưng nó đang tăng lên qua từng năm.năm.Do đó, cần khuyến khích sự chú ý về mặt lâm sàng và thực hiện các biện pháp cần thiết để tránh sự nhân bản và lây lan của CR-hvKP siêu vi khuẩn.Từ khóa: Klebsiella pneumoniae, kháng carbapenem, độc lực cao, chất nhầy cao, dịch tễ học
Klebsiella pneumoniae là một mầm bệnh cơ hội có thể gây ra nhiều loại nhiễm trùng, bao gồm viêm phổi, nhiễm trùng đường tiết niệu, nhiễm khuẩn huyết và viêm màng não.1 Trong ba mươi năm qua, không giống như Klebsiella pneumoniae cổ điển (cKP), một loại chất nhầy tăng niêm mạc Klebsiella pneumoniae (hvKP) độc lực cao đã trở thành một mầm bệnh quan trọng về mặt lâm sàng, có thể được tìm thấy trong các bệnh nhiễm trùng mạnh như áp xe gan gây ra ở người khỏe mạnh và những người bị suy giảm miễn dịch.2 Điều đáng chú ý là các bệnh nhiễm trùng này thường đi kèm với các bệnh nhiễm trùng lan tỏa phá hủy, bao gồm cả viêm nội nhãn và viêm màng não.3 Việc sản xuất cao hvKP kiểu hình niêm mạc thường là do sự gia tăng sản xuất polysaccharid hình mũ và sự hiện diện của các gen độc lực cụ thể, chẳng hạn như rmpA và rmpA2.4.Kiểu hình chất nhầy cao thường được xác định bằng "thử nghiệm dây".Các khuẩn lạc Klebsiella pneumoniae được nuôi cấy qua đêm trên đĩa thạch máu được kéo dài bằng một vòng lặp.Khi một sợi dây nhớt có chiều dài> 5mm được tạo thành, "thử nghiệm sợi dây" là dương tính.5 Một nghiên cứu gần đây cho thấy rằng peg-344, iroB, iucA, rmpA rmpA2 và rmpA2 là những dấu ấn sinh học có thể xác định chính xác hvkp.6 Trong nghiên cứu này, Klebsiella pneumoniae có độc lực cao được xác định là có kiểu hình nhớt nhầy cao (kết quả xét nghiệm chuỗi dương tính) và mang các vị trí liên quan đến plasmid độc lực Klebsiella pneumoniae (rmpA2, iutA, iucA) Trong những năm 1980, trường hợp của Đài Loan báo cáo lần đầu tiên được mô tả cộng đồng - áp xe gan mắc phải do hvKP, kèm theo tổn thương cơ quan nội tạng nghiêm trọng, chẳng hạn như viêm màng não và viêm nội nhãn.7,8 hvKP lây truyền lẻ tẻ ở nhiều nước Châu Á, Châu Âu và Châu Mỹ.Mặc dù một số trường hợp hvKP đã được báo cáo ở châu Âu và châu Mỹ, nhưng tỷ lệ phổ biến của hvKP chủ yếu xảy ra ở các nước châu Á, đặc biệt là Trung Quốc.9
Nhìn chung, hvKP nhạy cảm hơn với kháng sinh, trong khi viêm phổi Klebsiella kháng carbapenem (CRKP) ít độc hơn.Tuy nhiên, với sự lan rộng của các plasmid kháng thuốc và độc lực, CR-hvKP đã được Zhang et al lần đầu tiên mô tả.trong năm 2015, và ngày càng có nhiều báo cáo trong nước.10 Vì CR-hvKP có thể gây ra các bệnh nhiễm trùng nghiêm trọng và khó điều trị, nếu một bản sao đại dịch xuất hiện, nó có thể trở thành “siêu vi khuẩn” tiếp theo.Cho đến nay, hầu hết các ca nhiễm trùng do CR-hvKP đều xảy ra trong các trường hợp lẻ tẻ và rất hiếm khi xảy ra các vụ bùng phát quy mô nhỏ.11,12
Hiện tại, tỷ lệ phát hiện CR-hvKP thấp và có rất ít nghiên cứu liên quan.Dịch tễ học phân tử của CR-hvKP là khác nhau ở các vùng khác nhau, do đó cần nghiên cứu sự phân bố lâm sàng và đặc điểm dịch tễ học phân tử của CR-hvKP ở vùng này.Nghiên cứu này đã phân tích toàn diện các gen kháng thuốc, gen liên quan đến độc lực và MLST của CR-hvKP.Chúng tôi đã cố gắng điều tra sự phổ biến và dịch tễ học phân tử của CR-hvKP tại một bệnh viện cấp ba ở Thượng Hải, miền đông Trung Quốc.Nghiên cứu này có ý nghĩa to lớn đối với việc tìm hiểu dịch tễ học phân tử của CR-hvKP ở Thượng Hải.
Các chủng Klebsiella pneumoniae không lặp lại được phân lập từ Bệnh viện Nhân dân số 5 Thượng Hải trực thuộc Đại học Phúc Đán từ tháng 1 năm 2019 đến tháng 12 năm 2020 đã được thu thập hồi cứu và tỷ lệ phần trăm của hmKP, CRKP, CR-hmkp và CR-hvKP đã được tính toán.Tất cả các chủng phân lập được xác định bằng máy phân tích vi sinh vật tự động nhỏ gọn VITEK-2 (Biomerieux, Marcy L'Etoile, Pháp).Khối phổ Maldives (Bruker Daltonics, Billerica, MA, USA) được sử dụng để kiểm tra lại việc xác định các chủng vi khuẩn.Kiểu hình chất nhầy cao được xác định bằng "thử nghiệm dây".Khi kháng imipenem hoặc meropenem, tình trạng kháng carbapenem được xác định thông qua xét nghiệm tính nhạy cảm với thuốc.Klebsiella pneumoniae độc ​​lực cao được định nghĩa là có kiểu hình chất nhầy cao (kết quả xét nghiệm chuỗi dương tính) và mang các vị trí liên quan đến plasmid độc lực của Klebsiella pneumoniae (rmpA2, iutA, iucA) 6.
Một khuẩn lạc Klebsiella pneumoniae đơn lẻ được cấy trên đĩa thạch máu cừu 5%.Sau khi ủ qua đêm ở 37 ° C, kéo nhẹ khuẩn lạc lên bằng vòng cấy và lặp lại 3 lần.Nếu một dòng nhớt được hình thành ba lần và chiều dài lớn hơn 5mm, thì “kiểm tra dòng” được coi là dương tính và dòng có kiểu hình chất nhầy cao.
Trong máy phân tích vi khuẩn tự động nhỏ gọn VITEK-2 (Biomerieux, Marcy L'Etoile, Pháp), tính nhạy cảm của vi khuẩn đối với một số loại kháng sinh thường được sử dụng đã được phát hiện bằng cách pha loãng vi sinh trong nước dùng.Kết quả được diễn giải theo tài liệu hướng dẫn do Viện Tiêu chuẩn Phòng thí nghiệm và Lâm sàng (CLSI, 2019) phát triển.E. coli ATCC 25922 và Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 được sử dụng làm đối chứng cho thử nghiệm tính nhạy cảm với kháng sinh.
DNA bộ gen của tất cả các dòng Klebsiella pneumoniae được tách chiết bằng Bộ DNA bộ gen của vi khuẩn TIANamp (Công ty TNHH Công nghệ sinh học Tiangen, Bắc Kinh, Trung Quốc).Các gen β-lactamase phổ mở rộng (blaCTX-M, blaSHV và blaTEM), các gen carbapenemase (blaKPC, blaNDM, blaVIM, blaIMP và blaOXA-48) và 9 gen đại diện liên quan đến độc lực, bao gồm các loci giống pLVPK Plasmid (allS, fimH , mrkD, entB, iutA, rmpA, rmpA2, iucA và aerobactin) được khuếch đại bằng PCR như đã mô tả trước đây.13,14 Các gen đặc trưng cho kiểu huyết thanh nang (K1, K2, K5, K20, K54 và K57) được khuếch đại bằng PCR như mô tả ở trên.14 Nếu âm tính, hãy khuếch đại và sắp xếp trình tự locus wzi để xác định các gen đặc trưng cho kiểu huyết thanh hình mũ.15 Các loại mồi được sử dụng trong nghiên cứu này được liệt kê trong Bảng S1.Các sản phẩm PCR dương tính được giải trình tự bằng nền tảng giải trình tự NextSeq 500 (Illumina, San Diego, CA, Hoa Kỳ).So sánh trình tự nucleotide bằng cách chạy BLAST trên trang web NCBI (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi).
Việc nhập trình tự nhiều vị trí (MLST) được thực hiện như mô tả trong trang web MLST của Viện Pasteur (https://bigsdb.pasteur.fr/klebsiella/klebsiella.html).Bảy gen quản lý khoảng trốngA, infB, mdh, pgi, phoE, rpoB và tonB được khuếch đại bằng PCR và giải trình tự.Loại trình tự (ST) được xác định bằng cách so sánh kết quả giải trình tự với cơ sở dữ liệu MLST.
Sự tương đồng của Klebsiella pneumoniae đã được phân tích.DNA bộ gen của Klebsiella pneumoniae được chiết xuất làm mẫu, và các đoạn mồi ERIC được trình bày trong Bảng S1.PCR khuếch đại DNA bộ gen và tạo ra một dấu vân tay của DNA bộ gen.16 sản phẩm PCR được phát hiện bằng điện di trên gel agarose 2%.Kết quả lấy dấu vân tay DNA được xác định bằng nhận dạng băng tần phần mềm QuantityOne và phân tích di truyền được thực hiện bằng phương pháp nhóm ghép đôi không trọng số (UPGMA) của giá trị trung bình số học.Các cá thể phân lập có mức độ giống nhau> 75% được coi là cùng kiểu gen và các cá thể có mức độ giống nhau <75% được coi là các kiểu gen khác nhau.
Sử dụng gói phần mềm thống kê SPSS cho Windows 22.0 để phân tích dữ liệu.Dữ liệu được mô tả là trung bình ± độ lệch chuẩn (SD).Các biến phân loại được đánh giá bằng kiểm định chi bình phương hoặc kiểm định chính xác của Fisher.Tất cả các thử nghiệm thống kê đều có 2 phía và giá trị P <0,05 được coi là có ý nghĩa thống kê.
Bệnh viện Nhân dân số 5 Thượng Hải trực thuộc Đại học Phúc Đán đã thu thập 1081 chủng vi khuẩn Klebsiella pneumoniae từ ngày 1 tháng 1 năm 2019 đến ngày 31 tháng 12 năm 2020 và loại trừ các trường hợp phân lập trùng lặp khỏi cùng một bệnh nhân.Trong đó, 392 chủng (36,3%) là hmKP, 341 chủng (31,5%) là CRKP, 39 chủng (3,6%) là CR-hmKP và 16 chủng (1,5%) là CR-hvKP.Đáng chú ý là 33,3% (13/39) CR-hmKP và 31,2% (5/16) CR-hvKP là từ năm 2019, 66,7% (26/39) CR-hmKP và 68,8% (11/16 ) CR-hvKP được tách ra từ năm 2020. Từ đờm (17 chủng), nước tiểu (12 chủng), dịch dẫn lưu (4 chủng), máu (2 chủng), mủ (2 chủng), mật (1 phân lập) và tràn dịch màng phổi (1 cách ly), tương ứng.Mười sáu loại CR-hvKP đã được phục hồi từ đờm (9 loại phân lập), nước tiểu (5 loại phân lập), máu (1 loại phân lập) và tràn dịch màng phổi (1 loại phân lập).
Thông qua xác định chủng, kiểm tra độ nhạy với thuốc, kiểm tra chuỗi và phát hiện gen liên quan đến độc lực, 16 chủng CR-hvKP đã được sàng lọc.Đặc điểm lâm sàng của 16 bệnh nhân bị nhiễm phân lập CR-hvKP được tóm tắt trong Bảng 1. 13 trong số 16 bệnh nhân (81,3%) là nam giới và tất cả bệnh nhân trên 62 tuổi (tuổi trung bình: 83,1 ± 10,5 tuổi).Họ đến từ 8 phường, và hơn một nửa đến từ ICU trung tâm (9 trường hợp).Các bệnh cơ bản bao gồm bệnh mạch máu não (75%, 12/16), tăng huyết áp (50%, 8/16), bệnh phổi tắc nghẽn mạn tính (50%, 8/16), v.v ... Phẫu thuật xâm lấn bao gồm thở máy (62,5%, 10 / 16), ống thông tiểu (37,5%, 6/16), ống thông dạ dày (18,8%, 3/16), phẫu thuật (12,5%, 2/16) và ống thông tĩnh mạch (6,3%, 1/16).Chín trong số 16 bệnh nhân tử vong, và 7 bệnh nhân cải thiện và được xuất viện.
39 phân lập CR-hmKP được chia thành hai nhóm theo độ dài của chuỗi dính.Trong số đó, 20 chủng CR-hmKP có chiều dài chuỗi nhớt ≤ 25 mm được chia thành một nhóm và 19 chủng CR-hmKP có chiều dài chuỗi nhớt> 25 mm được chia thành một nhóm khác.Phương pháp PCR phát hiện tỷ lệ dương tính của các gen liên quan đến độc lực rmpA, rmpA2, iutA và iucA.Tỷ lệ dương tính của các gen liên quan đến độc lực CR-hmKP trong hai nhóm được trình bày trong Bảng 2. Không có sự khác biệt thống kê về tỷ lệ dương tính của các gen liên quan đến độc lực CR-hmKP giữa hai nhóm.
Bảng 3 liệt kê các cấu hình kháng kháng sinh chi tiết của 16 loại thuốc.16 chủng CR-hvKP phân lập đa kháng thuốc.Tất cả các chủng phân lập được điều trị bằng ampicillin, ampicillin / sulbactam, cefoperazone / sulbactam, piperacillin / tazobactam, cefazolin, cefuroxime, ceftazidime, ceftriaxone, cefepime, Cefoxitin, imipenem và meropenem đều bị đề kháng.Trimethoprim-sulfamethoxazole có tỷ lệ đề kháng thấp nhất (43,8%), tiếp theo là amikacin (62,5%), gentamicin (68,8%) và ciprofloxacin (87,5%).
Sự phân bố của các gen liên quan đến độc lực, gen kháng thuốc, gen huyết thanh dạng mũ và MLST của 16 chủng CR-hvKP được thể hiện trong Hình 1. Kết quả điện di trên gel agarose của một số gen liên quan đến độc lực, gen kháng thuốc kháng sinh và gen huyết thanh dạng mũ là được thể hiện trong Hình 1. Hình 2. Phân tích MLST cho thấy có tổng cộng 3 ST, ST11 là ST chiếm ưu thế nhất (87,5%, 14/16), tiếp theo là ST23 (6,25%, 1/16) và ST86 (6,25%, 1 / 16).Theo kết quả gõ wzi, 4 kiểu huyết thanh capsular khác nhau đã được xác định (Hình 1).Trong số 16 chủng phân lập hvKP kháng carbapenem, K64 là kiểu huyết thanh phổ biến nhất (n = 13), tiếp theo là K1 (n = 1), K2 (n = 1) và K47 (n = 1).Ngoài ra, chủng K1 serotype mũ là ST23, chủng K2 serotype hình mũ là ST86, 13 chủng K64 và 1 chủng K47 còn lại đều là ST11.Tỷ lệ dương tính của 9 gen độc lực trong 16 chủng CR-hvKP được thể hiện trong Hình 1., Các gen liên quan đến độc lực entB, fimH, rmpA2, iutA và iucA có trong 16 chủng CR-hvKP, tiếp theo là mrkD (n = 14), rmpA (n = 13), aerobacterin (n = 2), AllS (n = 1).16 CR-hvKP phân lập đều mang gen carbapenemase blaKPC-2 và gen β-lactamase phổ mở rộng blaSHV.16 chủng CR-hvKP phân lập không mang gen carbapenem blaNDM, blaVIM, blaIMP, blaOXA-48 và gen β-lactamase phổ mở rộng blaTEM, nhóm blaCTX-M-2 và nhóm blaCTX-M-8.Trong số 16 chủng CR-hvKP, 5 chủng mang nhóm gen β-lactamase phổ mở rộng blaCTX-M-1 và 6 chủng mang nhóm gen β-lactamase phổ mở rộng blaCTX-M-9.
Hình 1 Các gen liên quan đến độc lực, gen kháng thuốc chống vi khuẩn, gen kiểu huyết thanh hình mũ và MLST của 16 chủng CR-hvKP phân lập.
Hình 2 Điện di trên gel agarose của một số gen liên quan đến độc lực, gen kháng thuốc kháng sinh và gen huyết thanh dạng mũ.
Ghi chú: M, DNA marker;1, blaKPC (893bp);2, entB (400bp);3, rmpA2 (609bp);4, rmpA (429bp);5, iucA (239bp);6, iutA (880bp);7, Aerobacterin (556bp);8, K1 (1283bp);9, K2 (641bp);10, tất cả S (508bp);11, mrkD (340bp);12, fimH (609bp).
ERIC-PCR được sử dụng để phân tích tính tương đồng của 16 chủng CR-hvKP.Sau khi khuếch đại PCR và điện di trên gel agarose, có 3-9 đoạn DNA.Kết quả lấy dấu vân tay cho thấy 16 chủng CR-hvKP phân lập có tính đa hình cao, và có sự khác biệt rõ ràng giữa các chủng phân lập (Hình 3).
Trong những năm gần đây, ngày càng có nhiều báo cáo về các chủng CR-hvKP.Sự xuất hiện của các chủng phân lập CR-hvKP gây ra mối đe dọa lớn đối với sức khỏe cộng đồng vì chúng có thể gây ra các bệnh nhiễm trùng nặng, khó điều trị ở người khỏe mạnh.Trong nghiên cứu này, tỷ lệ lưu hành và đặc điểm dịch tễ học phân tử của CR-hvKP tại một bệnh viện cấp ba ở Thượng Hải từ năm 2019 đến năm 2020 đã được nghiên cứu để đánh giá liệu có nguy cơ bùng phát CR-hvKP hay không và xu hướng phát triển của nó trong khu vực này.Đồng thời, nghiên cứu này có thể cung cấp một đánh giá toàn diện hơn về khả năng lây nhiễm trên lâm sàng, điều này có ý nghĩa lớn trong việc ngăn chặn sự lây lan thêm của các chủng phân lập như vậy.
Nghiên cứu này đã phân tích hồi cứu sự phân bố lâm sàng và xu hướng của CR-hvKP từ năm 2019 đến năm 2020. Từ năm 2019 đến năm 2020, các chủng CR-hvKP phân lập có xu hướng ngày càng tăng.Khoảng 31,2% (5/16) CR-hvKP được phân lập vào năm 2019 và 68,8% (11/16) CR-hvKP được phân lập vào năm 2020, phù hợp với xu hướng tăng của CR-hvKP được báo cáo trong y văn.Kể từ khi Zhang et al.CR-hvKP được mô tả lần đầu tiên vào năm 2015,10. Ngày càng có nhiều tài liệu về CR-hvKP được báo cáo, 17-20 chủ yếu ở khu vực Châu Á - Thái Bình Dương, đặc biệt là ở Trung Quốc.CR-hvKP là siêu vi khuẩn có siêu độc lực, đa kháng thuốc.Nó có hại cho sức khỏe người dân và có tỷ lệ tử vong cao.Vì vậy, cần phải chú ý và thực hiện các biện pháp để ngăn chặn sự lây lan của nó.
Phân tích tính kháng kháng sinh của 16 chủng CR-hvKP cho thấy tỷ lệ kháng kháng sinh cao.Tất cả các chủng phân lập được điều trị bằng ampicillin, ampicillin / sulbactam, cefoperazone / sulbactam, piperacillin / tazobactam, cefazolin, cefuroxime, ceftazidime, ceftriaxone, cefepime, Cefoxitin, imipenem và meropenem đều bị đề kháng.Trimethoprim-sulfamethoxazole có tỷ lệ đề kháng thấp nhất (43,8%), tiếp theo là amikacin (62,5%), gentamicin (68,8%) và ciprofloxacin (87,5%).Tỷ lệ kháng CR-hmkp được nghiên cứu bởi Lingling Zhan và những người khác cũng tương tự như nghiên cứu này [12].Bệnh nhân nhiễm CR-hvKP mắc nhiều bệnh cơ bản, khả năng miễn dịch thấp, khả năng khử trùng độc lập yếu.Do đó, việc điều trị kịp thời dựa trên kết quả của xét nghiệm độ nhạy cảm với kháng sinh đồ là rất quan trọng.Nếu cần thiết, vị trí bị nhiễm bệnh có thể được tìm thấy và điều trị bằng cách dẫn lưu, khử trùng và các phương pháp khác.
39 phân lập CR-hmKP được chia thành hai nhóm theo độ dài của chuỗi dính.Trong số đó, 20 chủng CR-hmKP có chiều dài chuỗi nhớt ≤ 25 mm được chia thành một nhóm và 19 chủng CR-hmKP có chiều dài chuỗi nhớt> 25 mm được chia thành một nhóm khác.So sánh tỷ lệ dương tính của các gen liên quan đến độc lực CR-hmKP giữa hai nhóm, không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê về tỷ lệ dương tính của các gen độc lực giữa hai nhóm.Nghiên cứu của Lin Ze et al.cho thấy tỷ lệ dương tính với các gen độc lực của Klebsiella pneumoniae cao hơn đáng kể so với Klebsiella pneumoniae cổ điển.21 Tuy nhiên, liệu tỷ lệ dương tính của các gen độc lực có tương quan thuận với chiều dài của chuỗi dính hay không vẫn chưa rõ ràng.Các nghiên cứu khác đã chỉ ra rằng Klebsiella pneumoniae cổ điển cũng có thể là Klebsiella pneumoniae độc ​​lực cao, với tỷ lệ dương tính của các gen độc lực cao hơn.22 Nghiên cứu này cho thấy tỷ lệ dương tính với gen độc lực của CR-hmKP không tương quan thuận với độ dài của chất nhầy.Chuỗi (hoặc không tăng theo chiều dài của chuỗi dính).
Dấu vân tay ERIC PCR của nghiên cứu này là đa hình, và không có sự bắt chéo lâm sàng giữa các bệnh nhân, do đó 16 bệnh nhân nhiễm CR-hvKP là những trường hợp lẻ tẻ.Trước đây, hầu hết các trường hợp nhiễm trùng do CR-hvKP đã được báo cáo là các trường hợp đơn lẻ hoặc lẻ tẻ, các vụ bùng phát CR-hvKP ở quy mô nhỏ và 23,24 là rất hiếm trong y văn.11,25 ST11 là ST11 phổ biến nhất trong phân lập CRKP và CR-hvKP ở Trung Quốc.26,27 Mặc dù ST11 CR-hvKP chiếm 87,5% (14/16) trong số 16 chủng CR-hvKP phân lập trong nghiên cứu này, không thể giả định rằng 14 chủng ST11 CR-hvKP là từ cùng một dòng, vì vậy lấy dấu vân tay ERIC PCR bắt buộc.Phân tích đồng nhất.
Trong nghiên cứu này, tất cả 16 bệnh nhân bị nhiễm CR-hvKP đều được phẫu thuật xâm lấn.Theo báo cáo, đợt bùng phát tử vong do viêm phổi liên quan đến máy thở do CR-hvKP11 gây ra cho thấy các thủ thuật xâm lấn có thể làm tăng nguy cơ nhiễm CR-hvKP.Đồng thời, 16 bệnh nhân nhiễm CR-hvKP đều mắc các bệnh tiềm ẩn, trong đó bệnh mạch máu não là phổ biến nhất.Một nghiên cứu trước đây cho thấy bệnh mạch máu não là một yếu tố nguy cơ độc lập đáng kể đối với nhiễm CR-hvKP.28 Nguyên nhân của hiện tượng này có thể là do khả năng miễn dịch của bệnh nhân bị bệnh mạch máu não bị suy yếu, vi khuẩn gây bệnh không thể bị loại trừ một cách độc lập, và chỉ dựa vào tác dụng diệt khuẩn của chúng.Về lâu dài, kháng sinh sẽ dẫn đến tình trạng đa kháng thuốc và tăng đầy hơi.Trong số 16 bệnh nhân, có 9 bệnh nhân tử vong, tỷ lệ tử vong là 56,3% (9/16).Tỷ lệ tử vong cao hơn 10,12 trong các nghiên cứu trước và thấp hơn 11,21 được báo cáo trong các nghiên cứu trước.Tuổi trung bình của 16 bệnh nhân là 83,1 ± 10,5 tuổi, cho thấy người cao tuổi dễ bị CR-hvKP hơn.Các nghiên cứu trước đây đã chỉ ra rằng những người trẻ tuổi dễ bị nhiễm trùng hơn.Độc lực của Klebsiella pneumoniae.29 Tuy nhiên, các nghiên cứu khác đã chỉ ra rằng người cao tuổi dễ bị nhiễm Klebsiella pneumoniae24,28 độc lực cao.Nghiên cứu này phù hợp với điều này.
Trong số 16 chủng CR-hvKP, ngoại trừ một ST23 CR-hvKP và một ST86 CR-hvKP, 14 chủng còn lại đều là ST11 CR-hvKP.Kiểu huyết thanh capsular tương ứng với ST23 CR-hvKP là K1 và kiểu huyết thanh capsular tương ứng của ST86 CR-HVKP là K2, tương tự như các nghiên cứu trước đây.30-32 bệnh nhân nhiễm ST23 (K1) CR-hvKP hoặc ST86 (K2) CR-hvKP tử vong, và tỷ lệ tử vong (100%) cao hơn đáng kể so với bệnh nhân nhiễm ST11 CR-hvKP (50%).Như trong Hình 1, tỷ lệ dương tính của chủng ST23 (K1) hoặc ST86 (K2) của các gen liên quan đến độc lực cao hơn so với chủng ST11 (K64).Tỷ lệ tử vong có thể liên quan đến tỷ lệ dương tính của các gen liên quan đến độc lực.Trong nghiên cứu này, 16 chủng CR- hvKP đều mang gen carbapenemase blaKPC-2 và gen β-lactamase phổ mở rộng blaSHV.blaKPC-2 là gen carbapenemase phổ biến nhất trong CR-hvKP ở Trung Quốc.33 Trong nghiên cứu của Zhao và cộng sự, 25blaSHV là gen β-lactamase phổ mở rộng có tỷ lệ dương tính cao nhất.Các gen độc lực entB, fimH, rmpA2, iutA và iucA có mặt trong tất cả 16 chủng CR-hvKP, tiếp theo là mrkD (n = 14), rmpA (n = 13), anaerobicin (n = 2), allS (n = 1), tương tự như nghiên cứu trước.34 Một số nghiên cứu đã chỉ ra rằng rmpA và rmpA2 (bộ điều biến gen kiểu hình chất nhầy) có thể thúc đẩy sự tiết polysaccharid hình mũ, dẫn đến kiểu hình hypermucô và tăng độc lực.35 Vi khuẩn hiếu khí được mã hóa bởi gen iucABCD và các thụ thể tương đồng của chúng được mã hóa bởi gen iutA, vì vậy chúng có mức độ độc lực cao hơn trong xét nghiệm nhiễm G. mellonella.allS là marker của K1-ST23, không có trong pLVPK, pLVPK là plasmid độc lực từ loại siêu độc lực K2.allS là một chất kích hoạt phiên mã kiểu HTH.Các gen độc lực này được biết là đóng góp vào độc lực và chịu trách nhiệm cho sự xâm chiếm, xâm nhập và gây bệnh.36
Nghiên cứu này mô tả sự phổ biến và dịch tễ học phân tử của CR-hvKP ở Thượng Hải, Trung Quốc.Mặc dù sự lây nhiễm do CR-hvKP là lẻ tẻ, nhưng nó đang gia tăng qua từng năm.Các kết quả hỗ trợ nghiên cứu trước đây và cho thấy rằng ST11 CR-hvKP là CR-hvKP phổ biến nhất ở Trung Quốc.ST23 và ST86 CR-hvKP cho thấy độc lực cao hơn ST11 CR-hvKP, mặc dù cả hai đều là Klebsiella pneumoniae có độc lực cao.Khi tỷ lệ Klebsiella pneumoniae độc ​​lực cao tăng lên, tỷ lệ kháng Klebsiella pneumoniae có thể giảm, dẫn đến lạc quan mù quáng trong thực hành lâm sàng.Vì vậy, việc nghiên cứu độc lực và khả năng kháng thuốc của Klebsiella pneumoniae là cần thiết.
Nghiên cứu này đã được phê duyệt bởi Ủy ban Đạo đức Y tế của Bệnh viện Nhân dân số 5 Thượng Hải (số 104, 2020).Các mẫu lâm sàng là một phần của quy trình xét nghiệm thông thường của bệnh viện.
Cảm ơn tất cả các nhân viên của Phòng thí nghiệm Trung ương của Bệnh viện Nhân dân số 5 Thượng Hải đã hướng dẫn kỹ thuật cho nghiên cứu này.
Công trình này được hỗ trợ bởi Quỹ Khoa học Tự nhiên của Quận Minhang, Thượng Hải (số phê duyệt: 2020MHZ039).
1. Navon-Venezia S, Kondratyeva K, Carattoli A. Klebsiella pneumoniae: nguồn toàn cầu chính và con thoi cho kháng kháng sinh.Phiên bản sửa đổi về vi sinh của FEMS 2017;41 (3): 252–275.doi: 10.1093 / femsre / fux013
2. Prokesch BC, TeKippe M, Kim J,… Viêm tủy xương nguyên phát do độc tính cao.Lancet bị nhiễm Dis.2016; 16 (9): e190 – e195.doi: 10.1016 / S1473-3099 (16) 30021-4
3. Bắn AS, Bajwa RPS, Russo TA.Độc lực cao (siêu nhầy).Độc lực của Klebsiella pneumoniae.2014;4 (2): 107–118.doi: 10.4161 / viru.22718
4. Paczosa MK, Mecsas J. Klebsiella pneumoniae: Tiếp tục tấn công bằng hàng thủ chắc chắn.Microbiol Mol Biol Rev. 2016;80 (3): 629–661.doi: 10.1128 / MMBR.00078-15
5. Fang C, Chuang Y, Shun C, et al.Các gen độc lực mới của Klebsiella pneumoniae gây áp xe gan nguyên phát và biến chứng di căn của nhiễm trùng huyết.J Exp Med.2004; 199 (5): 697–705.doi: 10.1084 / jem.20030857
6. Russo TA, Olson R, Fang CT, v.v ... Xác định J Clin Microbiol, một dấu ấn sinh học được sử dụng để phân biệt Klebsiella pneumoniae độc ​​lực cao với Klebsiella pneumoniae cổ điển.2018; 56 (9): e00776.
7. YCL, Cheng DL, Lin CL.Áp xe gan do Klebsiella pneumoniae liên quan đến viêm nội nhãn nhiễm trùng.Bác sĩ thực tập Arch.1986; 146 (10): 1913-1916.doi: 10.1001 / archinte.1986.00360220057011
8. Chiu C, Lin D, Liaw Y. Viêm nội nhãn nhiễm trùng di căn trong áp xe gan có mủ.J Clinical Gastroenterology.Năm 1988; 10 (5): 524–527.doi: 10.1097 / 00004836-198810000-00009
9. Guo Yan, Wang Shun, Zhan Li, v.v ... Đặc điểm vi sinh và lâm sàng của các chủng Klebsiella pneumoniae có chất nhầy cao liên quan đến nhiễm trùng xâm lấn ở Trung Quốc.Các tiền tế bào bị nhiễm vi sinh vật.2017; 7.
10. Zhang Yi, Zeng Jie, Liu Wei, v.v ... Sự xuất hiện của một dòng Klebsiella pneumoniae kháng carbapenem kháng carbapenem trong các bệnh nhiễm trùng lâm sàng ở Trung Quốc [J].Nhiễm trùng J.Năm 2015;71 (5): 553–560.doi: 10.1016 / j.jinf.2015.07.010
11. Gu De, Dong Nan, Zheng Zhong, v.v ... Một đợt bùng phát gây tử vong của bệnh viêm phổi Klebsiella kháng độc lực cao kháng carbapenem ST11 tại một bệnh viện Trung Quốc: một nghiên cứu dịch tễ học phân tử.Lancet bị nhiễm Dis.2018; 18 (1): 37–46.doi: 10.1016 / S1473-3099 (17) 30489-9
12. Zhan Li, Wang S, Guo Yan, et al.Một sự bùng phát của chủng vi khuẩn Klebsiella pneumoniae kháng carbapenem ST11 siêu vi khuẩn Klebsiella pneumoniae tại một bệnh viện cấp ba ở Trung Quốc.Các tiền tế bào bị nhiễm vi sinh vật.2017; 7.
13. FRE, Messai Y, Alouache S, v.v ... Phổ độc lực của Klebsiella pneumoniae và mô hình nhạy cảm với thuốc được phân lập từ các bệnh phẩm lâm sàng khác nhau [J].Sinh lý bệnh.2013; 61 (5): 209-216.doi: 10.1016 / j.patbio.2012.10.004
14. Turton JF, Perry C, Elgohari S, v.v ... PCR xác định đặc điểm và loại Klebsiella pneumoniae sử dụng tính đặc hiệu của loại capsular, số lần lặp lại thay đổi và mục tiêu gen độc lực [J].J Med Vi sinh vật học.Năm 2010;59 (Chương 5): 541–547.doi: 10.1099 / jmm.0.015198-0
15. Brisse S, Passet V, Haugaard AB, v.v ... Giải trình tự gen Wzi, một phương pháp nhanh chóng để xác định loại nang Klebsiella [J].J Vi sinh lâm sàng.2013; 51 (12): 4073-4078.doi: 10.1128 / JCM.01924-13
16. Ranjbar R, Tabatabaee A, Behzadi P, v.v ... Các chủng E. coli phân lập từ các mẫu phân động vật khác nhau, vi khuẩn đường ruột lặp lại kiểu gen đánh máy phản ứng chuỗi polymerase đồng thuận (ERIC-PCR) [J].Iran J Pathol.Năm 2017;12 (1): 25–34.doi: 10.30699 / ijp.2017.21506